Electroforeza hemoglobinei

Sistem de recoltare:
EDTA (mov)
Durata:
13 zile

Informatii generale   Electroforeza hemoglobinei este un test care masoara diferitele tipuri de hemoglobina din sange printr-un procedeu de separare util identificarii formelor anormale de Hb. Intr-un camp electric particulele incarcate cu o anumita sarcina electrica se deplaseaza in functie de incarcarea lor electrica, de marimea si forma moleculei si de intensitatea campului electric. Acest lucru permite separarea Hb fiziologice si patologice, inclusiv a fractiilor minore. Hemoglobina reprezinta pigmentul respirator (pigmentul rosu) pentru toate vertebratele, fiind prezenta in eritrocite, unde are rol in transportul oxigenului (oxihemoglobina) si a CO2 (carbohemoglobina). Ea este formata dintr-o parte proteica – globina – si o parte prostetica – hemul care leaga fierul. Globina difera ca structura de la o hemoglobina la alta.. Desi s-au descris mai multe tipuri de hemoglobina, cele mai frecvente sunt: Hb A1, Hb A2, Hb F, Hb S, Hb C, Hb H si Hb M. La adultii sanatosi doar Hb A1 si Hb A2 sunt prezente in cantitati semnificative (Hb A1= 96-99%, HbA2 0.5-3.5%). De asemenea sunt prezente si cantitati scazute de Hb F (principalul tip de hemoglobina fetala), dar acestea nu au importanta decat daca nivelul lor depaseste 2% din hemoglobina totala. Talasemia majoră se caracterizează prin persistenta nivelelor ridicate a Hb F după nastere (65-100% din Hb totala) . Talasemia minoră se asociază doar cu 1-3% Hb F, restul reprezentand Hb A1 şi Hb A2. Hb S este un tip anormal de hemoglobina care se intalneste in siclemie (anemia cu celule in secera). Aceasta hemoglobina formeaza gramezi atunci cand nivelul de oxigen este scazut si confera eritrocitelor forma de secera. Deoarece aceste eritrocite se lizeaza cu usurinta, pacientul cu eritrocite in forma de secera prezinta si o anemie. Hb C este tot un tip anormal de hemoglobina asociat cu anemia hemolitica. Eritrocitele care contin aceasta hemoglobina se lizeaza mai usor decat eritrocitele normale. Simptomele anemiei hemolitice sunt mult mai blande decat cele ale siclemiei. Tipurile C, D, E, H, S de hemoglobina rezulta din substituirea unui aminoacid în timpul formarii Hb si sunt ereditare   Recomandari pentru efectuarea electroforezei hemoglobinei:   -anemie hemolitica de etiologie necunoscuta -istoric familial de hemoglobinopatii -diferenţierea tipurilor de talasemie.   Conditii de recoltare:   Recoltarea se face dimineata pe nemancate. Se recolteaza sange venos atat cat permite vacuumul. Recoltarea se face in  vacutainer cu anticoagulant- EDTA ( vacutainer cu dop  mov), Mod de prelucrare: proba se centrifugheaza . Eritrocitele se separa si se spala cu ser fiziologic dupa care sunt hemolizate. Probele se pot pastra pana la 7 zile la 2-8°C. Nu se ingheata.   Nu se lucreaza probele coagulate sau hemolizate   Metoda de masurare – electroforetica   Valori de referinta:   Adulti/ varstnici: -Hb A1: 96-99% -Hb A2: 0.5-3.5% -Hb F: 1-2% -Hb S: 0% -Hb C: 0% Copii (Hb F): -nou-nascut: 50-80% -pana la 6 luni: <8% -peste 6 luni: 1-2%   Semnificatie clinica: Rezultatele sunt modificate in talasemia minora/majora, siclemie, hemoglobina C, hemoglobina H   Interpretarea rezultatelor: β -Talasemia minora- HbF- 1-3%, HbA1- 50-81%, HbA2-  4-6% din hemoglobina totala β -Talasemia majora- HbF- 65-100% din hemoglobina totala Siclemie- HbS- 80-100%, HbA2- 2%, Hb F- 2% din hemoglobina totala Anemia cu HbC- 90-100% din hemoglobina totala Anemia cu HbH ori Hb Bart (α- talasemia)- 5-30%, HbA1- 65-90%, HbA2- 2-3% din hemoglobina totala Sindromul Lepore- prezinta o hemoglobina anormala, Hb Lepore- 5-20 % (migrare asemanatoare HbS). Hb A si A2 fie sunt scazute fie absente si inlocuite de HbF.   Interferenţe   Transfuziile sanguine în ultimile 12 saptamani pot modifica rezultatele. Deficitul de fier scade nivelele Hb A2, C şi S; trebuie rezolvata hiposideremia si apoi executata electroforeza hemoglobinei. Probele centrifugate insuficient sau spalarea hematiilor cu solutii saline nu vor furniza o hemoliza clara. Pacientii homozigoti „S” care au tratament cu Hydrea (hydroxiurea) pot induce sinteza de HbF. Mobilitatea acestei hemoglobine induse, in unele cazuri, poate fi diferita de hemoglobinele F fiziologice. Probele stocate mai mult de 7 zile pot determina in urma fractiunii HbA o pata care nu trebuie interpretata ca o varianta de hemoglobina (hemoglobinele H sau Bart)